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称号:Quasi Vivo细胞灌流培育体系
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产物简介:

英国Kirkstall公司立异研发Quasi Vivo灌流培育体系,可为细胞培育供给耐久恒定的活动培育环境,比拟传统静置培育体系,能最大限制摹拟体内环境,增进细胞发展和分解。

品牌:英国Kirkstall

产物申明:
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Quasi Vivo细胞灌流培育体系

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英国Kirkstall公司立异研发Quasi Vivo灌流培育体系,可为细胞培育供给耐久恒定的活动培育环境,比拟传统静置培育体系,能最大限制摹拟体内环境,增进细胞发展和分解。

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视频先容:

 

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倾覆传统细胞培育体例,Quasi Vivo灌流培育体系

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灌流培育

呼吸道上皮细胞的气液界面培育是研讨经氛围传布的病原体,如SARS等的经常操纵的模子。传统的培育体例是用TransWell在通俗培育箱中静置培育。可是此种培育体例没法摹拟培育进程中养分物资和代谢废料在构造内的运输,培育取得的模子凡是有各类百般的缺点,并且所需尝试周期较长。

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呼吸道上皮细胞的惯例transwell活动培育体例

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Quais Vivo(QV600)灌流培育体系(腔室+储液瓶+底座+管道+泵等)

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而Quasi Vivo灌流培育体系可为细胞培育供给耐久恒定的流动培育环境,最大限制摹拟体内环境。研讨发明,操纵Quasi Vivo体系停止灌流培育与静态培育比拟,气液界面培育的呼吸道上皮细胞(一般人气管上皮细胞 Normal Human Bronchial Epithelial Cells,简称NHBE;吝啬道上皮细胞 Small Airway Epithelial Cells,简称SAE),发育分解速率更快,表现为纤毛分解度更高,纤毛活动更强、黏液发生和樊篱功效更强。在贯注下加快分解后,将上皮细胞转移到静态前提下,并增加抗原呈递细胞(APC)以研讨其在病原体传染后的功效。(Chandorkar P, et al., Fast-track development of an in vitro 3D lung/immune cell model to study Aspergillus infections. Sci Rep. 2017 7(1):11644. doi: 10.1038/s41598-017-11271-4.

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01、人体内一切的细胞都须要养分物资和代谢废料的活动

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02、肺部气管/支气管和吝啬道上皮布局邃密,停止体外培育摹拟体内环境,对呼吸道病原体的研讨相当主要

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03、接纳全新的灌流培育体例培育呼吸道上皮细胞(接纳QV600)

 

比拟操纵transwell活动培育(Static Conditions),Quasi Vivo灌流培育体系(Perfused Conditions)中,呼吸道上皮细胞的发展和分解显现更好状况  

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04、电镜照片显现,接纳灌流培育体例(Perfused conditions)的呼吸道上皮细胞,分解水平更高

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05、操纵MUC5B染色能够发明,接纳灌流培育体例(Perfused conditions)的呼吸道上皮细胞,在培育的第7天便可排泄大批黏液。用OCCLUDIN染色能够发明,细胞间的慎密毗连发育更完美

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06、操纵WGA染色发明,接纳灌流培育体例(Perfused conditions)的呼吸道上皮细胞,纤毛分解度更高

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07、丈量TEER(经细胞电阻),接纳灌流培育体例(Perfused conditions)的呼吸道上皮细胞TEER值更大,代表取得的上皮细胞膜状布局更完全

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Quasi Vivo环球操纵

环球操纵Kirkstall公司Quasi Vivo灌流培育体系的学术及研讨机构已达70+个,遍布美国、英国、法国、瑞典、奥天时、意大利、荷兰、瑞士、日本等。今朝Quasi Vivo灌流培育体系已胜操纵于以下器官模子的培育:

1. 呼吸体系(培育热门)

2. 肝脏

3. 肾脏

4. 血汗管

5. 成纤维细胞

6. 糖尿病模子

7. 血脑樊篱

8. 脑构造类器官

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、差别细胞,Quasi Vivo型号如何选?

 

01、单一细胞

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QV500:一切腔室培育不异的细胞。

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02、细胞共培育 

 

QV600每一个腔室培育2种或以上细胞。

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QV900使管路下流的细胞培育基成为下流细胞的前提培育基。

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活动培育构成含血管的3D心脏构造 | 再生医学

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在再生医学范畴,如何培育出含血管的构造,是将来操纵可否胜利的关头之一。初期的临床尝试接纳发展因子或细胞打针的体例来修补毁伤的心脏,但因为打针细胞构成的炎症反映和局部缺血会在体内构成低氧环境,使得打针的细胞定植率低而灭亡率高,不能有用地修复毁伤的心脏功效。

 

Quasi Vivo QV500活动培育体系为接种在明胶支架上的人世充质干细胞(hMSCs)和民气肌祖细胞(hCMPC)供给充沛的氧气,增进细胞和养分物资向支架焦点内分散,并能疾速有用地解除构造内的代谢废料,增进血管天生,从而构成由血管样和心脏样细胞构成的构造布局麋集的适于体内移植的原构造。(Pagliari S, et al. A multistep procedure to prepare pre-vascularized cardiac tissue constructs using adult stem cells, dynamic cell cultures, and porous scaffolds. Frontiers in Physiology. 2014; 5: 210)

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Quasi-Vivo活动培育体系 (QV500型)的爬动泵将培育基从储液瓶泵到两个串连的培育腔室内,并能坚持恒定流速(200μl/min),保障多孔明胶支架内层的培育基活动。

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构建含血管的3D心脏的尝试计划表示图。明胶多孔支架被浸入浓缩的Matrigel中,而后转移至内皮分解培育基中。以后将人世充质干细胞接种在支架上,使人世充质干细胞定植在支架培育上并向内皮停止分解,96小时后,将在聚苯乙烯细胞培育板专心脏分解培育基事后定型2周的心脏TNT-GFP民气肌祖细胞接种于血管化的支架上,用QV500活动培育体系在心脏分解培育基中培育7天。

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接纳上述尝试计划,对用QV500培育一周后的共培育布局停止检测,发明在支架上有大批细胞定殖。

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QV500活动培育前提下支架外部浸润了大批的血管样细胞(白色)和民气肌前体细胞(hCMPC)衍生的心肌细胞(绿色),而静态培育前提下,细胞大局部散布在支架外表。

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免疫组化成果显现经由进程QV500静态培育能够增进心肌样细胞(GFP,绿色)和内皮样细胞(VCAM-1阳性细胞,白色)向支架外部浸润。

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(A) 切片显现QV500活动培育的内皮样细胞(VCAM-1阳性细胞,白色)摆列成孔状,构成管状布局,并与心肌样细胞(GFP,绿色)打仗。(B)QV500活动培育前提下,支架内普遍的细胞散布致使构成麋集组装的多细胞构造,该构造衍生自所用的人世充质干细胞(hMSCs)和民气肌前体细胞(hCMPC)。

 

总结:在本文中操纵的QV500活动培育体系,能加强氧气与养分物资的运输,进而加强工程化血汗管构造的活性和功效。

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与众差别的Quasi Vivo活动培育体系,让日、美、英、法、瑞士、瑞典等环球70多个研讨机构取得了更壮大的细胞培育东西,在包含呼吸体系、血汗管体系、肝脏、肾脏、肠道、脑构造类器官,和糖尿病的研讨上更进一步。

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活动培育完成血脑樊篱三种细胞共培育 | 阿尔茨海默病新模子

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血脑樊篱(blood-brain barrier, BBB)在中枢神经体系(CNS)的心理和病理中都起着主要的感化。血脑樊篱功效非常会引发包含阿尔茨海默症(AD)等很多神经退行性疾病。构成血脑樊篱的毛细血管内皮细胞(capillary endothelial cells)、周细胞(pericytes)和星形胶质细胞(astrocytes)间的庞杂的彼此感化使得很难在体内肯定这三种细胞对神经毒性各自的进献。

 

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而Quasi Vivo活动培育体系可为体外培育这三种细胞供给在不构成樊篱的环境下保持细胞间通讯的最好培育环境。Quasi Vivo活动培育体系为将来研讨差别范例的血脑樊篱细胞在中枢神经体系疾病和细胞毒性尝试中的出格感化供给一个有代价的东西。(Miranda-Azpiazu P, et al. A novel dynamic multicellular co-culture system for studying individual blood-brain barrier cell types in brain diseases and cytotoxicity testing. Sci Rep. 2018; 8(1): 1-10.)

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1. 零丁培育的人星形胶质细胞(AGFAP阳性)、周细胞(B,α-actin阳性)、血管内皮细胞(CCD31阳性)和血管内皮细胞构成的慎密毗连(DZO1阳性)。

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2  Quasi-Vivo QV500培育同享不异的培育基的星形胶质细胞、周细胞和血管内皮细胞的表示图(A),R为储液瓶,P为爬动泵。毗连培育基存储瓶的一个Quasi-Vivo QV500活动培育体系的细胞培育腔室(B)。

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3 Quasi-Vivo QV500活动培育体系成立的能同时培育三种差别细胞的多细胞共培育体系。

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4 几种活动培育体例表示图:A图为零丁星形角质细胞活动培育,B图为零丁周细胞活动培育,C图为零丁血管内皮细胞活动培育,D图为三种细胞组合后一路活动培育。

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5 MTT法测细胞活气,与静态培育比拟,接纳Quasi-Vivo QV500活动培育体系对零丁培育血管内皮细胞(HBECs)、周细胞(HBVPs)、星形角质细胞(HAs)(A)或三种细胞共培育(B)的血管内皮细胞的细胞活气有较着降低。

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图6 用MTT法测细胞活气,与静态培育(Static)比拟,活动培育(Dynamic)的周细胞(HBVPs)会更早遭到Aβ25-35(淀粉样卵白β肽的Aβ25-35片断,用于阿尔茨海默病的造模)的迫害。

 

总结:本文中研讨者操纵Quasi-Vivo QV500活动培育体系成立了三种细胞的共培育。这些细胞不打仗,经由进程同享培育基完成细胞间的通讯,不构成樊篱能更好的研讨这些细胞范例零丁对差别化合物的呼应环境。并且研讨者还发明同享不异培育基的星形胶质细胞、周细胞和血管内皮细胞的最适流速为50 µl/min。


作为立异的细胞培育体例,Quasi Vivo活动培育已环球70余家专业机构操纵考证,取得了使人侧目标培育结果,在美、英、法、日等多国展开了颇具新意的细胞研讨,触及呼吸体系、肝脏、肾脏、血汗管、成纤维细胞、糖尿病模子、脑构造类器官等。


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